PCR i njegovu prirodu i opseg

lančane reakcije polimeraze (PCR) - metoda molekularne biologije, koji omogućava da se otkrije u biološkom materijalu male količine dezoksiribonukleinske kiseline (DNK), odnosno neke od njegovih fragmenata, i množite ih mnogo puta. Onda su vizuelno identifikovao gel elektroforezom. Reakcija je razvijen u 1983. K. Mullis i uključeni u popis izvanrednih otkrića posljednjih godina.

Koji su mehanizmi PCR

Ceo postupak se temelji na sposobnosti nukleinskih kiselina sebi ponavljanja, da je u ovom slučaju održati umjetno u laboratoriju. Replikacije DNK ne može početi bilo kom regionu molekula, ali samo u područjima sa specifičnim sekvenca nukleotida - početni fragmenata. Da bi za lančanu reakciju polimeraze je počela, treba nam prajmer (ili DNA sonde). To su kratki fragmenti DNK sa datim nukleotida niz. Oni su komplementarni (i.e., što odgovara) početak DNK uzorak porcije.

Naravno, da se stvori kapisli, naučnici moraju proučavati slijed nukleotida od nukleinske kiseline, koja je uključena u postupak. Ove DNA sonde osigura specifičnost reakcije i njegovo pokretanje. Lančana reakcija polimeraze neće ići, ako se uzorak ne nađe barem jednog molekula željene DNK. U principu, reakcija zahtijeva iznad kapisle, skup nukleotida, otporne na toplotu DNK polimeraze. Potonji je enzim - katalitičke reakcije sintezu novih molekula nukleinske kiseline na osnovu uzorka. Sve ove supstance, uključujući biološke materije, koja je neophodna za identifikaciju DNK se kombinuju u reakcijske smjese (rješenje). Nalazi se u poseban termostat koji obavlja vrlo brzo zagrijavanje i hlađenje unutar određenog vremena - ciklusa. Oni su obično 30-50.

Kako je ovo reakcija

Suština ovoga je da u toku jednog ciklusa, prajmeri su u prilogu dijelove željenog DNA, nakon čega ide udvostručenje enzimom. Na osnovu rezultat DNK sintetiziran u narednim ciklusima sve više i više komada identičnih molekula.

lančane reakcije polimeraze dosljedno oporavila nakon njene korake. Ga odlikuju prvi udvostručiti količinu proizvoda tokom svakog ciklusa grijanja i hlađenja. U drugom koraku reakcije dolazi do usporavanja jer je enzim je oštećen i gubi aktivnost. Osim toga, osiromašeni zalihe nukleotida i prajmera. U posljednjoj fazi - platou - proizvodi nisu više akumulirati kao reagensi gotovo.

Gdje se koristi

Nesumnjivo, najširu primjenu lančane reakcije polimeraze pronalazi u medicini i nauci. Koristi se u javnim i privatnim biologije, veterine, farmacije, pa čak i ekologije. Dok drugi rade za praćenje kvaliteta hrane i okoliša objektima. Aktivno koriste lančane reakcije polimeraze u forenzičke praksi potvrditi očinstvo i identifikacija identiteta osobe. U forenzičke znanosti, kao i paleontologije, često ova metoda je jedini način, jer to je obično na raspolaganju za proučavanje izuzetno male količine DNK. Naravno, vrlo široko korišćen metod se nalazi u praksi medicine. On ju je potrebno u oblastima kao što su genetika, infektivnih i onkoloških bolesti.