Serološke testove: vrste, upotreba

Laboratorijske dijagnostike praktično svih zaraznih bolesti se zasniva na otkrivanju krvi u antitela pacijenta, koji su proizvedeni od strane patogena antigena, serološke metode. Otišli su u medicinsku praksu krajem devetnaestog - početkom dvadesetog stoljeća.

Razvoj nauke je pomogao da se definiše antigene strukture mikroba i kemijske formule njihovih toksina. Moguće je da se stvori ne samo terapeutski već i dijagnostičkih seruma. Oni su dobiveni administriranja oslabljenih uzročnika laboratorijskih životinja. Nakon nekoliko dana upijajući krvi zečeva ili miševa pripremljene proizvode koji se koriste za identifikaciju bakterija ili njihovih toksina koristeći serološke testove.

Spoljašnje manifestacije ove reakcije ovisi o uvjetima svog sastava i stanja antigena u krvi pacijenta. Ako mikrobi su netopive čestice, oni izmire, lysed, imobilisani ili vezan u serumu. Ako se antigeni su rastvorljivi, čini se fenomen neutralizacije ili padavina.

aglutinacije (PA)

Serološki test aglutinacije je vrlo specifičan. To je lako izvesti i prilično je jasno da se brzo otkrije prisustvo antigena u serumu pacijenta. To se koristi za podešavanje Vidal reakcije (dijagnoze tifusa i paratifusne) i Weigl (tifus).

Ona se zasniva na određenom interakcija između ljudskih antitijela (ili agglutinins) i mikrobiološke ćelija (agglyutenogenami). Nakon njihovog interakcija su formirane čestice koje talože. Ovo je pozitivan znak. Za postavljanje reakcija mogu se koristiti živa ili mrtva mikroba agenata, gljivica, protozoa, krvnih zrnaca i somatskih ćelija.

Hemijske reakcije je podijeljena u dvije faze:

1. Specifična antitijela spoj (AT) sa antigenima (Ag).
2. Nespecifičnih - taloženja konglomerata AG-AT, odnosno formiranja slijepljen.

Reakcija indirektni aglutinacije (TPHA)

Ova reakcija je osjetljivija od prethodnog. Ona se koristi za dijagnozu bolesti uzrokovanih bakterijama, intracelularni paraziti, protozoa. To je toliko specifičan da mogu otkriti čak i vrlo niske koncentracije antitijela.

Za njegova formulacija koristi pročišćena ovce crvenih krvnih zrnaca i crvena krvna zrnca ljudskih prethodno tretirane sa antitijela ili antigena (to ovisi o tome što laboratoriju želi da pronađe). U nekim slučajevima, ljudska crvena krvna zrnca tretirane imunoglobulina. odgovor serološki eritrocita se smatra važećom ako padavine tome došlo na dnu epruvete. Pozitivne reakcije možemo reći kada se ćelije raspoređeni u obliku obrnutog kišobrana, zauzima cijelu dnu. Je negativna reakcija je postigao kada crvena krvna zrnca se nasele u obliku kolone ili tipke u središtu dna.

padavina reakcije (RP)

Serološke reakcije ovog tipa služe za identifikaciju izuzetno sitnih čestica antigene. To može biti, na primjer, proteina (ili njihove delove), spojevi proteina lipidima ili ugljikohidrata, dio bakterija i njihovih toksina.

Sera za reakciju se dobija umjetni zaraze životinja, obično zečevi. U ovoj metodi, možete dobiti apsolutno nikakve predisponirajući serumu. Staging serološke padavine sličan mehanizam djelovanja na aglutinacije. Antitela sadržane u serumu vežu za antigene u koloidnom rješenje da se formira veliki proteinskih molekula, koje se talože na dnu cijevi ili na podlogu (gel). Ova metoda se smatra visoko specifičan i može otkriti čak i tragovi supstance.

Koristiti za dijagnozu kuga, tularemija, antraks, meningitisa i drugih bolesti. Također su uključeni u vještačenje.

test padavina gel

Serološke testove može se vršiti ne samo u tečnom mediju, ali u agaroznom gelu. To se zove difuzno metoda padavina. Uz to, proučite sastav kompleksa antigeni mješavina. Ova metoda se zasniva na hemotaksu antigena na antitijela, i obrnuto. Gel se kreću jedni prema drugima na različitim brzinama i sastanak da se formira padavina linije. Svaka linija - jedan set od K-AT.

Neutralizacija egzotoksina antitoksin (RN)

Antitoksični serumu može neutralizirati egzotoksina koji mikroorganizmi proizvode. Na osnovu ovih podataka i serološke testove na bazi. Mikrobiologija koristi ovu metodu za titracije seruma, toksina i toksoide, kao i njihove terapijske aktivnosti. Snaga neutralizaciju toksina određuje konvencionalnih jedinica - AE.

Osim toga, zbog toga reakcija može odrediti vrsta ili vrsta koje pripadaju egzotoksina. Se koristi u dijagnostici tetanusa, difterije, botulizam. Studija se može izvršiti "na staklo", i gela.

lize reakcije (DL)

Imuni serum, koji ulazi u tijelo pacijenta, ima, osim njegova glavna funkcija pasivnog imuniteta, čak i litičke svojstva. To je sposoban za raspuštanje mikroba agenata, mobilni i stranih elemenata virus ulazi u tijelo pacijenta. Ovisno o specifičnosti antitijela uključena u serumu izolovana bactericidin, cytolysins, spirohetoliziny, hemolysins i drugi.

Ove specifičnih antitijela se nazivaju "dopuna". Nalazi se u gotovo svim tjelesnim tekućinama, on ima složenu strukturu proteina i vrlo je osjetljiva na povećanje temperature, potresen, kiseline i direktne sunčeve svjetlosti. Ali u sušenim država je u stanju da održe svoju litičke svojstva do šest mjeseci.

Postoje neke vrste serološke testove ovog tipa:

- Bakterioliza;

- hemolize.

Bakterioliza se izvodi pomoću krvnog seruma pacijenta i specifične imuni serum sa živim klice. Ako je, onda je istraživač vidi lizu bakterija, i odgovor će se smatrati kao što je prisutna u krvi dovoljan broj pozitivnih dopuna.

Drugi odgovor krvi serološkim je da je suspenzija eritrocita tretira pacijenta serum koji sadrži hemolysins, koji se aktiviraju samo u prisustvu određenog kompliment. Ako postoji, onda u laboratoriju gledanje raspada crvenih krvnih zrnaca. Ova reakcija je naširoko koristi u modernoj medicini za određivanje titra komplementa (tj najmanjih količina izazivanje lizu crvenih krvnih zrnaca) u krvnom serumu i za proizvodnju dopuna vezivanja testa. Bilo je to na ovaj način vrši serološke reakcije na sifilis - Wasserman.

dopuna fiksacija (RSK)

Ova reakcija se koristi za otkrivanje serumu antitijela pacijentu jednog infektivnog agensa, kao i da se identifikuju tvorac svoje antigeni strukture.

Do sada smo opisali jednostavan serološke testove. RAC smatra teško reakcija, jer interakciju ne dva, već tri elementa: antitijela, antigena i dopunjuju. Njegova suština je u tome da je interakcija između antitijela i antigena javlja samo u prisutnosti proteina komplimente koje se adsorbira na površini formira kompleks K-AT.

Sebe antigena nakon toga komplementa, izložen promjenama, koje ukazuju na kvalitet reakcije. To može biti lize, hemolize, imobilizacija, baktericidno i bakteriostatski učinak.

Sama reakcija se odvija u dvije faze:

1. Formiranje antitijela-antigena, što nije vizualno uočljiv istraživač.
2. Mijenjanje antigen pod dejstvom dopuna. Ova faza obično može pratiti golim okom. Ako je vizualni odgovor nije vidljiv, a zatim koristite dodatni sistem indikator koji omogućava otkrivanje promjena.

indikator sistema

Ova reakcija se zasniva na vezivanje dopuna. Epruvete sata nakon postavljanja dodao RSK pročišćene ovaca eritrocitima i serumu hemolitičke ne sadrže dopuna. Ako je cijev je ostao nevezane dopuna, on će se pridružiti kompleks N-AT formirana između ovce krvnih zrnaca i hemolysin, i uzrokovati njihovo raspuštanje. To bi značilo da je DGC je negativan. Ako crvena krvna zrnca ostala netaknuta, a onda, shodno tome, reakcija je pozitivan.

hemaglutinacija (RHA)

Postoje dva fundamentalno različita hemaglutinacija. Jedan od njih - serološke, koristi se za određivanje krvnih grupa. U ovom slučaju eritrocita interakciju s antitijela.

A druga reakcija nije vezana za serološke, od crvenih krvnih zrnaca reagiraju s hemaglutinina proizvodi virusa. Pošto svaki exciter djeluje samo na određene eritrocita (piletina, ovce, majmun), možemo pretpostaviti da je to reakcija usko specifična.

Jasan pozitivan ili negativan odgovor, moguće je za lokaciju krvnih zrnaca u dnu cijevi. Ako oni shvate liči na obrnuti kišobran, a zatim željeni virus prisutan u krvi pacijenta. A ako svi crvenih krvnih zrnaca formirana kao novčić kolone, ne postoje nepoznati patogena.

Reakcija hemaglutinacija inhibicije (HAI)

Ovo visoko specifična reakcija, što omogućava da se utvrdi oblik, tip virusa ili prisustvo specifičnih antitijela u serumu krvi pacijenta.

Njegova suština je u tome da je dodan u epruvetu koja sadrži ispitnog materijala antitijela, sprečava taloženje antigena na eritrocitima, čime se zaustavlja hemaglutinacija. Ovo je kvalitativna pokazatelj prisustva specifičnih antigena u krvi na određeni željeni virus.

Reakcija imunofluorescencije (RIF)

Reakcija se temelji na mogućnost identifikacije kompleksa sa AT-AH fluorescentne mikroskopije nakon tretmana flyuorohromnymi boje. Ova metoda je jednostavan za korištenje, ne zahtijeva izolaciju čiste kulture i uzima malo vremena. To je neophodno za brzu dijagnostiku zaraznih bolesti.

U praksi, ovi serološki testovi su podijeljeni u dvije kategorije: direktne i indirektne.

Direktni RIF proizveo antigen koji je prethodno obrađen fluorescentne serumu. I indirektno je da je droga se prvo tretira s konvencionalnim diagnosticum čine antitijela na željeni antigen i zatim ponovo primijeniti fluorescentne surutke, koji je specifičan za proteine kompleksa K-AT i mikrobiološke ćelije postaju vidljivi po mikroskopom.