Ploskireva srednje (Bacto agar F): opis. medicinska mikrobiologija

Ploskireva medij (u daljnjem tekstu dalje Bacto agar F) je hranjivu podlogu za uzgoj određenih mikroorganizama, prvenstveno Shigella i Salmonella. Kao izvor za nju upotrebu zaraženi materijala: urin, žuč, izmet.

priča

Nikolay Ivanovich Ploskirev - sovjetski mikrobiolog i počasnog doktora. On je rođen 1869., a umro je 1948. godine, nakon što je radio većinu svog života u svom rodnom gradu - Tomsk.

1888. godine, on, budući naučnik, bez završenog šestog razreda škole, pridružio vojsci. on je bio u mogućnosti da završe obuku samo 1892. godine, a zatim položili ispite za upis na Imperial Tomsk univerzitetu, studirao je na Medicinskom fakultetu. 1898. dobio je titulu doktora.

Ploskirev učestvovali u rusko-japanskog rata, a nakon što je radio u Tomsk bolnici. Godine 1910. imenovan je na mjesto šefa Tomsk dermatoloških i polne bolnice, i za trideset godina je svoj stalni glavu. Isti naučnik je bio jedan od osnivača STI klinike u Tomsk.

Nikolay Ivanovich Ploskirev napisao niz radova posvećen borbi protiv polne bolesti.

struktura

Srijeda Ploskireva - materijal za uzgoj crijevnih bakterija, te stoga mora sadržavati više vrsta hranjivih tvari. Proizvodi se u suvom obliku.

Prilično veliki dio ukupne mase je pankreasa hidrolizat sprat (10,4 g / l). Nešto manje činili hydrocitrate dibazični natrij (8.5 g / l). Također tu je suvi nutrijent čorbu i mlečni šećer (8.62 i 7.3 g / l).

Drugi naslov Ploskireva srednje - J. Bacto agar u sastavu je prisutan u količini od agara, 6,94 g / l. Seriovatistokislogo bezvodni sadržaj natrijuma jednak 5,1 g / l. Tu je prisustvo bezvodnog dinatrijev fosfat - 2,1 g / l, natrij soli Cholic kiseline oko 3,46 g / l i sode - 2,4 g

Manje od grama sadržane u njemu pokazatelja - neutralno crveno (0.05) i sjajan zelena (0.0002). Joda sadržaja - 0,13.

aplikacija

Studija biohemijskih procesa bakterija igra veoma važnu ulogu u dijagnozi bolesti koje uzrokuju anaerobni organizmi. Vrsta u ovoj porodici - stotine. Oni su gotovo identični u morfologiji i kulturnih dobara, i najpouzdaniji način da ih razlikuju jedni od drugih - je proučavanje biohemije.

Studija počinje inokulacije patološkog materijala u medij kulture. Ona je patološki diferencijal za koliformnih bakterija i dio nje, pored običnom agar, uključuje svjetlo i laktozu. Obradu sposobnost laktoze - važan znak diferencijacije enterobakterije. Ako je to otkriveno, pH pomera prema kiselosti i indikator se aktivira, koja pretvara kolonije.

Druge zemlje mogu koristiti druge hranjivoj podlozi, ali je njihov mehanizam djelovanja odgovara tri najčešća u Rusiji - ovom okruženju Endo i Levine Ploskireva srijedu.

Opis metode

Inozemstvu Ploskireva analogni medij je tzv MacConkey agaru. Gotovih obliku transparentno rješenje ima svetlo roze-žute boje. Kolonije u mogućnosti da obrađuju laktozu, među Ploskireva dati crveni (brusnica) boja. Ako se bakterija ne može obraditi, ili kolonija je bezbojna ili ima slabu boju.

S obzirom da je sastav srednje sadrži supstance Ploskireva inhibitori (sjajan zeleno, žučne soli, jod), ona je gotovo u potpunosti inhibira rast gram-pozitivnih floru, kao iu prvi dan eshehiry znatno usporava rast, kao i druge uobičajene istovremeno mikrofloru.

revanšu

Dalje od interesa je izbor kolonije, a to je zasejana na primarnoj medij za pohranu i diferencijacije. Okruženje u kojem postoji sjetve treba da sadrži više podloge. Bakterijska kultura treba otkriti enzimsku aktivnost u odnosu na njih, na isti medij smještena u cijevi, tako da postoje dvije lokacije:

• u kojem kosim agar;
• sa kolone.

Interes istraživača u koloniji naseljeno odrezani dio gusta moždanog udara i u koloni - kreten. U ovoj fazi, materijalu koji se koristi Russell, Kligler ili Olkenitskogo. Kao diferencijalna dijagnoza se koristi i Ploskireva srijedu.

Mikrobiologije i patogeni organizmi

Agar Ploskireva je važan faktor u otkrivanju infekcije uzrokovane Enterobacteriaceae. Tako, na primjer, se uzgaja i diferencirana kolonija mikroorganizama koji uzrokuju bacilnom dizenterije. Ovo anaerobni organizmi pripadaju rodu Schigella.

Kao i svi koji je dio porodice crijevnih bakterija, Shigella imaju oblik štapova, veličine dva mikrometara. Oni ne predstavljaju kapsule i spore imaju flagella - to im omogućava da se razlikuje od salmonele, koja, zauzvrat, su mobilne. Oni dobro raste na najjednostavniji medija, na temperaturi malo iznad ambijentalne (35-37 ° C) i 7,4 pH. Po prirodi rasta, kolonije ne razlikuju od salmonele.

Kao što je već rečeno, mikroorganizmi mogu biti znatno morfološke razlike, međutim, značajno variraju u biohemijske procese života. Tako je, osim za Shigella Nyukestl, bez formiranja kiseline plina nastaje tijekom fermentacije ugljikohidrata. Sa izuzetkom Shigella sonnei, oni ne mogu da fermentiraju laktozu, ali se vari glukoze. Samo da svoje ključne funkcije, možete ih nositi sve što mogu kako bi se smanjila niraty do nitrita. Njihove kolonije su vari sa ureom, kao iu srednjem kulturi postoji utečnjavanje želatina.

Prikupljanje i priprema sjemena

Za otkrivanje agenti dizenterija, potrebni su mikrobiološke testove zaraženi okruženja, tj izmet pacijenta. Nakon prijema materijala, morate što je brže moguće uraditi sjetve. Ako to nije moguće, izvor mora biti stavljen u konzervans - fosfat pufera mješavina ili glicerol. Na 4 ° C, mogu se čuvati duže od jednog dana. Prikupiti materijal mora se obavljati pomoću rektalne stakla cijev koja je umetnuta u rektum.

Za studije materijala odabranih gnojna sluz komada koje treba oprati za dva do tri cijevi izotonični natrijum hlorida.

Primjena patogenih bakterija u okruženju Ploskireva je staklo lopaticom. Potrebno je da utrljati na mali dio svog agar, zatim otkinuti spatule na životnu sredinu, a ostatak materijala utrljava u Sown površinu. Ako je sjetve vrši u nekoliko kupova, onda svaki od njih je potrebno zasaditi nove serije.

Ako Muco-gnojnim komada tamo uzimanje na posebnom analizom, to ne znači da ne postoji prisustvo patogena. U tom slučaju, potrebno je emulguju izmet u 10 ml natrijevog klorida (koncentracija 0,85%), a zatim posijati jedan ili dva kapi na medij Ploskireva. Non-Emulsified stolica može biti posijano u selenitovy supi. On se koristi, ako se, umjesto izmet su bljuvotine ili pranja.

Mikrobiološka dijagnostika

U prvoj fazi mikrobioloških studija obavlja sjetvu patogenih bakterija u dvije čaše, a zatim gledati kako raste Shigella. U srijedu Ploskireva proizveo usjeva, a drugi - na životnu sredinu ili Endo Levin.

S obzirom na činjenicu da je bilo sojeva Shigella su otporne na antibiotike, u srednjem je dopunjena hloramfenikolom. Zatim se javlja u roku od dana inkubacije u inkubatoru na 37 ° C

Drugog dana da istraži uzgaja kolonije. Oni koji nisu na dijagnostički medij diferencijal uzgaja bezbojna, neophodno je da se iskorijeni srednje ili kratko Russell "šarenih red." Dalja istraživanja sprovodi algoritam primarnog usjeva na njima. Kolonije Shigella u srijedu Ploskireva rastu u obliku transparentan, bezbojan i male kolone. Oni su od dvije vrste:

• spljošten s rubova razuđen;
• zaobljene, konveksan, sa tipičnim mokrim sjaj.

Tri ili četiri kolonije mora biti mikroskopirovat i ispitati za mobilnost. Ako ona ne pojavi, oni preseljeni u srijedu Olkenitskogo da izoluje čista kultura. U nedostatku karakterističnih kolonija Shigella ili ako se posmatra na sve nema rasta, potrebno je Endo agar ili Ploskireva proizvode zasijavanje selenitovogo bujona. Ako su prisutni u dovoljnom broju tipične kolonije, stavi procijenjena aglutinacije. Mješavina seruma sonnei i Flexner, reakcija se javlja na staklu.

dalja istraživanja

Trećeg dana su promjene koje su se dogodile u kolonijama na srednjem Russell. Ako postoji kultura koja ne degradiraju laktozu i glukozu fermentira da proizvede kiselina, ona je odvojena i analizira, troše mikroskopija, kao i izvršiti sjetvu u "šarenih red", ali ovaj put proširen. Samo spusti aglutinacija reakcije, kako bi se serološke identifikacije.

Na zadnji dan, može se zaključiti na temelju promjena u "šarenih broj" (ako postoji fermentacija ugljikohidrata), kao i rezimira aglutinacije reakcije.

Skladištenje i priprema

Priprema agar Ploskireva javlja kako slijedi:

1. 55 g suhe tvari je izazvao u litri destilirane vode.
2. Kuhani za dva do tri minuta dok agar još nije potpuno otopio.
3. Sipajte u Petri (sterilitet opcionalno) sloj od 5-6 mm.
4. Ploče su ostala otvorena za pola sata na sobnoj temperaturi (18-25 stupnjeva). Nakon tog vremena medij dovoljno Harden i suha.

Srijeda Ploskireva fotosenzitivne i higroskopan. Prah treba čuvati u zatvorenoj ambalaži, relativna vlažnost u prostoriji ne smije biti veća od 60%. Optimalna temperatura za skladištenje od 2 ° C do 25 ° C Skladištenje mora biti u skladu sa ovim pravilima, inače moguće netačne zaključke.