Mikrobioloških metoda za proučavanje vode, tla i zraka

Mikroorganizmi - sitne, uglavnom jednoćelijskih stvorenja, koja su rasprostranjena u prirodi. Nalaze se u svim medijima (zrak, tlo, voda) kod ljudi i životinja, u biljkama.

Kvalitativna raznolikost i broj organizama prvenstveno zavisi od nutritivnih sastojaka. Ali je isto tako važno kao i vlažnost, temperatura, aeracija i djelovanja sunčevih zraka i drugih faktora.

природных сред позволяют выявить наличие патогенных микроорганизмов, определить их количество и, в соответствии с полученными результатами, выработать меры по устранению или предупреждению инфекционных заболеваний. Metode za sanitarne i mikrobiološke studije prirodni mediji mogu otkriti prisustvo patogena i da se utvrdi njihov iznos u skladu sa dobijenim rezultatima, razviti mjere za uklanjanje ili sprečavanje zaraznih bolesti. Osim toga, kvantitativna račun je potrebno za modeliranje ekosistema i razvoj prirodnih procesa upravljanja. . Razmotrimo dalje ono što su metode mikrobioloških ispitivanja.

tlo

To se smatra učenjaci kao jedan od mogućih puteva prenosa zaraznih patologija. Sa sekreta ljudi i životinja pacijent u tlu prodire patogena. Neki od njih, posebno, spora, može istrajati u tlu dugo vremena (ponekad i desetljećima). позволяют определить "микробное число" (кол-во микроорганизмов в грамме грунта), а также коли-индекс (количество кишечных палочек). Tlo pada patogenima kao što opasne infekcije, kao što su tetanus, antraks, botulizam, i tako dalje. Metode sanitarno-mikrobiološke istraživanja tla omogućuju vam da definirate "mikroba" (broj mikroorganizama u tlu grama), a coli indeks (broj E. coli) .

analize zemljišta: pregled

следует в первую очередь отнести прямое микроскопирование и посев на плотную питательную среду. Metode za mikrobiološki pregled zemljišta treba prvenstveno pripisati direktno mikroskopije i kulture na čvrste hranljive podloge. Populacije mikroorganizama i njihovih grupa koje nastanjuju tlo, razlikuju na taksonomski status i ekološke funkcije. U nauci, oni su ujedinjeni pod generičkim pojmom "bioti tlo." Primer - stanište velikog broja mikroorganizama. U gram zemljišta je prisutan od 1 do 10 milijardi ćelija. U takvom okruženju, aktivno se razlaganje organske materije, uz učešće različitih saprofitnih mikroorganizama.

Mikroskopski studije mikrobioloških metoda: koraci

Analiza srednjih počinje sa uzorkovanja. Za tu svrhu, prethodno oguljene i naribanim alkohol nož (lopatu može se koristiti). Nakon toga, priprema uzorka. Sljedeći korak - računati ćelije obojene mrlje. Razmotriti svaki korak posebno.

uzimanje uzorka

U analizi poljoprivrednog zemljišta imaju tendenciju uzorak uzet iz dubine od čitavog sloja. Prva uklonjena 2-3 cm iznad tla, jer može biti prisutan u nevažnih mikroflore. Nakon toga, sa površinom od tla studirao uzeti monoliti. Dužina svakog od njih mora biti u skladu sa debljina sloja iz kojeg želite da probaju.

Na parceli od 100-200 četvornih. 7-10 m odabranih uzoraka. Težina svakog - reda od 0,5 kg. Uzorci moraju biti temeljno miješati u torbu. Onda uzmi prosječna uzorak težine oko 1 kg. To treba staviti u pergament (sterilne) paket uklopiti u platnenu vrećicu. Prije usmjeriti analizu uzorka pohranjene u hladnjaku.

Anketa Priprema

Je izazvao tlo sipao na suho staklo. Njegova prethodno obrisati sa alkoholom i spaliti iznad plamenika. Lopaticom tlo temeljito pomiješana i proširen ravnomjerno. To je obavezno ukloniti korijene i drugih stranih elemenata. Da biste to učinili, koristite pincete. Prije operacije pincete i lopaticom iznad plamenik upalio i ostavljena da se ohladi.

Različitih parcela zemljišta distribuira na staklu, odabrana male porcije. Oni težio u porculansku posudu na tehničkoj razini. является специальная обработка образца. Obavezan korak mikroskopska metoda mikrobioloških studija je posebnom obradom uzorka. 2 mora biti unaprijed pripremljena, sterilna boca. Njihova veličina ne smije biti veća od 250 ml. Jedan od boca se sipa u 100 ml vode iz slavine. Zato što je potrebno 0,4-0,8 ml tečnog uzorak tla i natopljenom u pastu. Mešavina se utrljava s prsta ili gumenim tučkom za 5 minuta.

Voda iz prve pljoske prebačeni u zemljišne mase prazna boca. Nadalje, trljajući leđima. Nakon ove mase se prenosi u bocu u blizini plamenika plamena. Kontejner sa suspenzijom tla je potresena na shaker 5 min. Nakon toga, bilo je da odstoje oko 30 sekundi. To je neophodno kako bi se omogućilo velikih čestica da se nastane. Nakon pola minuta masovno se koristi za pripremu pripremu.

Ćelija na fiksiranog razmaza

, разработанному Виноградским. Direktni mikroskopski istraživanja tla se vrši metodom mikrobioloških studija, razvijena Vinogradskii. U određenu količinu suspenzija je brojao ćelija mikroorganizama. Proučavajući fiksiranog razmaza može pohraniti droge u dugoročne i obavljaju proračuni u bilo kojem trenutku.

Priprema lijeka kako slijedi. Određena količina cisterne (obično 0,02-0,05 ml) se nanosi mikropipeta na slajd. Da bi se to rješenje je dodana kap agar-agar (polisaharid agaropectin preparata i agaroznom izvađen iz smeđe i crvene alge Crno more), izazvao brzo i prostire se na površini 4-6 kvadratnih. cm. Pap klima suha i fiksna za 20-30 minuta. alkohol (96%). Dalje, droga natopljenom destiliranom vodom i staviti u p-p karbolnog eritrozin 20-30 min.

Nakon bojenja, ona se pere i suši na zraku. Ćelija izvode iz uranjanja u objektiv.

Sjetve na čvrstoj podlozi

позволяют выявить большое количество микроорганизмов. Mikroskopske metode za mikrobiološki pregled može otkriti veliki broj mikroorganizama. Ali, uprkos tome, metoda inokulacije je najčešći u praksi. Njegova suština se sastoji od sijanja iznosu od droge (suspenzija tla) u Petri posudu na čvrstoj podlozi.

позволяет учитывать не только количество, но и групповой, а в ряде случаев и видовой состав микроскопической флоры. Ova metoda mikrobioloških istraživanja uzima u obzir ne samo količina nego i grupa, au nekim slučajevima, i sastav vrsta mikroskopskog flore. Računajući broj kolonija proizvedenih, obično iz dna Petri jelo prenosi svjetlo. Na izračunate području postavljen marker ili tinte dot.

Analiza vode

Mikroflore vodnog tijela, po pravilu, odražava mikroba sastav tla oko njega. имеют особое практическое значение при изучении состояния конкретной экосистемы. U tom kontekstu, metode sanitarno-mikrobiološke analize vode i tla su posebno praktični značaj u proučavanju stanja određenog ekosistema. Sveže vode sadrži, u pravilu, koka, štap u obliku bakterija.

Anaerobi u vodi nalaze u malim količinama. Po pravilu, oni umnožiti na dnu tijela vode, u blatu, koji učestvuju u procesu pročišćavanja. Mikroflore okeana i mora pogodno predstavljeni halofitna (halophilic) bakterija.

U vodi, arteški bunari su praktično nema mikroorganizama. To je zbog kapaciteta filtriranja sloja tla.

считаются определение микробного числа и коли-титра либо коли-индекса. Konvencionalnih metoda mikrobioloških istraživanja vode u obzir definiciju mikroba i coli-titar ili ako-indeksa. Prvi pokazatelj određuje broj bakterija u 1 ml tečnosti. Coli indeks predstavlja broj koliformnih bakterija prisutnih u litru vode, a ako titra - minimalni broj ili maksimalno razvodnjavanje tečnosti u kojima se mogu i dalje biti otkrivene.

Određivanje mikrobne broj

Ova metoda sanitarnih mikrobiološki pregled vode je kako slijedi. U 1 ml vode se određuje broj mezofilnih i fakultativnih anaeroba (srednji) aerobima sposoban na meso pepton agar (primarni medij) na 37 stupnjeva. tokom dana da se formira kolonije vidljive na uvećanje 2-5 str. ili golim okom.

является посев. Ključni korak metoda mikrobiološka analiza vode zasijane. Jer svaki uzorak posijano najmanje 2 različite zapremine. Kada se napravi analiza vode iz slavine u svakom šolju 1-0.1 ml čistog tečnih i kontaminirane ,01-,001 ml. Za inokulaciju od 0,1 ml ili manje zapremine tečnosti razrijediti s destiliranom (sterilna) vode. Dosljedno pripremite decimalna razrjeđenja. 1 ml svakog od njih se izrađuje u dva Petri.

Uzgoj ispunjen nutrijenata agar. Ona prvo mora otopiti, i cool do 45 stupnjeva. Nakon miješanje, aktivni medij je ostavljen na horizontalnu površinu za očvršćavanja. Na 37 stepeni. usjevi se uzgajaju tijekom dana. позволяет учитывать результаты на тех чашках, где количество колоний находится в пределах от 30 до 300. Razmatrane metode mikrobioloških istraživanja vode uzima u obzir rezultate od onih jela gdje je broj kolonija u rasponu od 30 do 300.

zrak

Smatra se tranzit tlo za mikroorganizme. являются седиментация (оседание) и аспирация. Glavne metode mikrobioloških studija su klimatizirane sedimentacije (taloženje) i aspiracije.

vazduhom mikroflora je proizvoljno podijeljena u varijablu i konstanta. U prvu grupu spadaju kvasac, hromogene cocci, spore-bearing bacillus coli i drugih mikroorganizama koji su otporni na sušenje, izloženost svjetlu. Predstavnici varijabla mikroflora, prodire u zrak iz svojih uobičajenih staništa, dugo zadržati svoju vitalnost.

U vazduhu velikih gradova mikroorganizama mnogo više nego u vazduhu okruženju ruralnih područja. Preko mora, šume su vrlo malo bakterija. Prečišćavanje vazduha olakšati padavina: snijeg i kiša. Indoors mikroba mnogo više nego na otvorenom prostoru. Njihov broj se povećava u zimskom periodu u nedostatku redovnog ventilacije.

sedimentacija

считается простейшим. Ova metoda mikrobioloških istraživanja u mikrobiologiji se smatra da je najjednostavnije. Ona se zasniva na rješavanju kapljica i čestica na površinu agara u otvorenom Petri jelo pod gravitacije. metoda sedimentacije ne može precizno utvrditi broj bakterija u zraku. Činjenica je da se u otvorenom kup uhvatiti fine frakcije čestica prašine i kapljica bakterijske prilično teško. Na površini zadržao uglavnom velikih čestica.

Ova metoda se ne koristi za analizu zraka. Ovo okruženje karakterizira velika fluktuacija u brzini protoka zraka. Sedimentacija može, međutim, da se koristi u nedostatku više sofisticiranih uređaja ili izvor električne energije.

Određivanje broja mikroba obavlja Omelyansky metodom. U skladu s tim, za 5 minuta na površini od 100 kvadratnih agar. cm slegne broj bakterija je prisutna u 10 litara zraka.

Naručite 535 "Na ujedinjenje mikrobioloških metoda istrage"

Bakteriološku analizu zauzima važno mjesto u kompleksu kliničkih i laboratorijskih aktivnosti usmjerene na dijagnozu, prevenciju i liječenje raznih zaraznih bolesti. Međutim, studija životne sredine, oni nisu ograničeni.

Od posebnog značaja je bakteriološka analiza biološkog materijala u bolnicama. Za istraživanja u zdravstvenim ustanovama, povećanih zahtjeva. Svrha Reda "Na ujedinjenje mikrobioloških metoda istrage" je da se poboljša bakteriološku analizu, poboljšanje kvaliteta i efikasnost mikrobiološke dijagnostike.

Mikroskopskim pregledom razmaza kod žena

To je ključna metoda analize za dijagnozu infekcije, spolno prenosive infekcije, i oportunističke infekcije (oportunističkih bakterija).

Mikroskopska analiza za procjenu kvalitativni i kvantitativni sastav mikroflore, provjeriti ispravnost uzorkovanja. Na primjer, prisustvo vaginalnog epitela u bris uzet iz cervikalnog kanala ukazuje na kršenje pravila izbora biološkog uzorka.

Kaže se da je mikrobiološki pregled, u ovom slučaju se obično slijedi neke probleme. Oni se odnose na činjenicu da je u donjem genitalnog trakta je obično predstavljaju raznolik mikrofloru koja varira u različitim uzrastima. Da bi se poboljšala efikasnost istraživanja i razvili su standardizirani pravila.

Dijagnoza virusnih infekcija

To se provodi metodama otkrivanja RNK i DNK patogena. Oni se zasnivaju prvenstveno na određivanje sekvence nukleotida u patološkim materijalom. Za tu svrhu, molekularne sonde. Oni su umjetno proizvedeni nukleinske kiseline komplementaran (komplementarne) virusne kiseline označen s radioaktivnim etiketi ili biotin.

Specifičnost metode se ponavlja kopiranje specifične DNA fragment koji sadrži nekoliko stotina (ili desetina) parova nukleotida. replikaciju (kopiranje) je da proširenje može početi samo u određenim jedinicama. prajmera (prajmeri) koji se koristi za kreiranje. Oni su sintetiziran oligonukleotida.

PCR dijagnostiku (lanac reakcije polimeraze) je jednostavan u izvršenju. Ova metoda omogućuje vam da brzo dobiti rezultat pomoću male količine patoloških materijala. PCR dijagnostika identificira akutnog, hronični i latentne (skrivene) infekcija.

Kada se smatra bolje osjetljivost ove metode. Međutim, trenutni test sistemi nisu pouzdani dovoljno, tako da je dijagnoza PCR ne može u potpunosti zamijeniti tradicionalne metode.